果膠酶活性檢測試劑盒 微量法
產品內容:提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存。 試劑一:液體 25mL×1 瓶,4℃保存。若溶液中有不溶解物質,可以 50℃水浴溶解。 試劑二:液體 20mL×1 瓶,4℃避光保存。 標準品:粉劑×1 支,10mg 半乳糖醛酸。臨用前加入 0.943mL 蒸餾水,配成 50µmol/mL 的標準液
產品說明:果膠酶(pectinase)是分解果膠的酶類,包括原果膠酶,果膠酯酶,多聚半乳糖醛酸酶和果膠 裂解酶四大類,廣泛存在于高等植物果實和微生物中,是水果加工中重要的酶。 果膠酶水解果膠生成半乳糖醛酸,半乳糖醛酸與 DNS 試劑反應生成在 540nm 有特征吸收峰的 棕紅色物質,測定 540nm 處吸光值變化可計算得果膠酶活性。
試驗中所需的儀器和試劑: 可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、微玻璃比色皿/96 孔板、可調式移液槍、研 缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟:
一、粗酶液提取: 組織:按照組織質(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液)進行冰浴勻漿,然后 10000g,4℃,離心 10min,取上清置于冰上待測。 菌類:按照細胞數(104 個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細胞加 入 1mL 提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時間 3min);然后 10000g, 4℃,離心 10min,取上清置于冰上待測。 液體:直接檢測。
相關文獻:
《Transcription factor VmSeb1 is required for the growth, development, and virulence in Valsa mali》 作者:Yuxing Wu,Liangsheng Xu,Zhiyuan Yin,Hao Feng,Lili Huang 期刊:Microbial Pathogenesis 影響因子:2.332 PMID:29959044
《Two members of the velvet family, VmVeA and VmVelB, affect conidiation, virulence and pectinase expression in Valsa mali》 作者:Yuxing Wu , Liangsheng Xu , Zhiyuan Yin , Qingqing Dai , Xiaoning Gao, Hao Feng , Ralf T. Voegele , Lili Huang 期刊:Molecular Plant Pathology 影響因子:4.379 PMID:29127722
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